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ELISA试剂盒显色温育反应

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          ELISA试剂盒广泛应用在免疫学检验的各领域中,有着灵敏度高、特异性强、经济性较好等优点,下面我们来说说ELISA试剂盒的显色温育反应。
  ELISA试剂盒约40分钟显色达,随即逐渐减弱,至2小时后即可*消退至无色。TMB的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
  ELISA试剂盒实验中显色是ELISA试剂盒中的zui后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,ELISA试剂盒加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显se情况适当缩短或,及时判断。
  ELISA试剂盒的实验操作程序简述:
  1.准备试剂,样品和标准品;
  2.加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟;
  3.洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟;
  4.洗板5次,加入显色液A、B,37℃反应10分钟;
  5.加入终止液;
  6.15分钟之内度OD值;
  7.计算。
 
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