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Insphero 3D悬滴板:研究肿瘤与间质细胞的相互作用

点击次数:2774 发布时间:2014/12/10
提 供 商: 北京群晓科苑生物技术有限公司 资料大小:
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Development of an Innovative 3D Cell Culture System to Study Tumour - Stroma Interactions in Non-Small Cell Lung Cancer Cells

采用创新的三维细胞培养系统,研究非小细胞肺癌细胞与间质细胞的相互作用

 

介绍:使用新颖的三维(3D)共培养模型----Insphero AG研发的GravityPLUS 3D悬滴培养系统(GravityPLUS 3D cell culture platform), 研究非小细胞肺癌(NSCLC) 细胞系和肺成纤维细胞的共培养。使用GravityPLUS 3D悬滴培养系统可以研究肿瘤-间质间的相互作用,是更接近于体内的细胞培养模型。

 

方法:使用多孔悬滴微量培养板(GravityPLUS 3D cell culture platform),研究单细胞的3D培养和多细胞的3D共培养。在悬滴培养板中,研究NSCLC细胞系之 A549细胞的单独培养、NSCLC细胞系之 Colo699细胞的单独培养、A549与肺成纤维细胞的共培养、和Colo699与肺成纤维细胞的共培养。肿瘤微球体形成并稳定后(培养5天和10天后),使用Annexin V/Propidium Iodide(膜联蛋白V/碘化丙啶)对微球体染色并用流式观测;肿瘤成纤维细胞微球体形成后用电镜(SEM)、荧光显微镜、半薄切片和免疫组化(IHC)观测;除了这些常规组织学检测,还用免疫组化的方法检测钙粘素、波形蛋白、肿瘤增殖抗原Ki67、纤连蛋白、角蛋白7和平滑肌肌动蛋白(a-SMA)的表达量。

 

结果:A549单细胞微球体与A549与成纤维细胞培养共培养的微球体相比,生存能力要差一些;而Colo699微球体的生存能力要比Colo699共培养的强。 ki67的表达量在单细胞培养和共培养也存在很大的差异。波形蛋白表达量的增加和钙粘素表达量的减少都能被监测到,表明三维培养过程中存在间质表型的转变。除此之外,只有成纤维细胞系与A549细胞系共培养的时候,才有表达a-SMA,从而表明一种间质状态向另一种间质状态转换。

 

结论:证明GravityPLUS 3D悬滴培养系统(GravityPLUS 3D cell culture platform)是研究肿瘤微球体共培养的很有利的工具。而且,这些微球体可以进一步探讨肿瘤与间充质间的相互作用,可以更好的反映出肿瘤细胞在体内微环境的状态。Insphero开发的GravityPLUS 3D悬滴培养系统将会为研发抗癌剂及寻找生物标记物做出一些贡献。

 

 

Insphero 3D悬滴培养板产品介绍:http://www.qbiotec.com/qxky001-Brand-24075/

 

 
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