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技术文章

磁珠分离技术与产品——ReSyn Biosciences

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ReSyn Biosciences生产MagReSyn系列新一代的高分子聚合物微球(微粒)产品,这一平台是生物医学领域科研和应用的好帮手。
ReSyn聚合物技术生产高磁性的系列磁性分离、富集产品。MagReSyn分离产品用于蛋白质组学,分子和细胞生物学领域。另外,根据客户需求生产超高荷载能力的MAX产品,满足低洗脱体积的需求。
产品包括
1.         NTA
2.         SAX
3.         Tio2
4.         Zro2
5.         Ti-IMAC
6.         HILIC
7.         Amine
8.         Carboxyl
9.         Streptavidin
10.     Protein A
11.     Protein G
12.     Trypsin
13.     Chymotrypsin
详情如下:
1.       MagReSyn NTA & NTA筛选试剂盒 (MagReSyn NTA & NTA Screening Kit)
用于6x 组氨酸标签蛋白的快速亲和纯化
MagReSyn NTA微颗粒具有强金属螯合能力的氨三乙酸(nitrilotriacetic acid, NTA)残基。MagReSyn NTA预先与镍离子螯合,用于亲和纯化组氨酸蛋白。鉴于不同类型的组氨酸标签蛋白可能对不同的金属离子亲和性存在差异,ReSyn Biosciences提供系列组氨酸标签蛋白纯化筛选试剂盒(MagReSyn NTA-KIT),产品为与四种不同二价金属离子(Ni2+, Cu2+, Co2+, Zn2+)螯合的MagReSyn NTA,方便用户找到针对自身靶蛋白的适纯化方案。
2.       MagReSyn SAX
离子交换法快速实现蛋白分级分离(protein fractionation)
MagReSyn SAX强阴离子交换剂通过利用净电荷差异来逆向吸收与自身电荷相反的分子,用于蛋白/肽,酶,抗体等生物分子的捕获,纯化和回收。这种磁性聚合微粒是血清,血浆,尿液,脑脊液(CSF),细胞裂解液,细胞培养上清液等复杂生物样品理想的分级分离产品,用在双向电泳,HPLC和质谱分析前处理中。这种具有荷载能力的微粒能满足高度的浓缩需求,实现小洗脱体积。
3.       MagReSyn TiO2
TiO2-功能性微粒(TiO2-functional microspheres)用于磷酸肽的高特异性富集
蛋白磷酸化参与多种细胞过程,约30%蛋白可实现磷酸化修饰。很多研究聚焦于蛋白的翻译后修饰。然而,因磷酸化肽丰度低,化学计量低和理化特性等因素,导致长期以来蛋白质组尺度上的磷酸化研究都是蛋白质组学研究的一个重要挑战。因此,当前迫切需要能特异富集磷酸化肽、且与质谱分析兼容的富集技术。
MagReSyn TiO2-功能性微粒能在复杂生物样品的蛋白消化物中高特异,高重复性富集磷酸化肽。二氧化钛选择性亲和、富集磷酸化的丝氨酸,丝氨酸和酪氨酸。MagReSyn TiO2微粒经工程化处理实现特异性大化,在同类产品中卓尔不群,具有*的磷酸肽回收能力。
MagReSyn TiO2微粒可以单独使用也可与MagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC联合应用,富集不同类型的磷酸肽。
4.       MagReSyn ZrO2
ZrO2-功能性微粒(ZrO2-functional microspheres)用于磷酸肽的高特异性富集
在复杂的蛋白消化产物中实现磷酸化肽的高特异性富集是当前蛋白质组学研究的重要挑战。当前,有多种具有不同特异性和亲和性的磷酸化肽分离技术,这些技术或单独或联合,用于磷酸肽的富集、回收中。MagReSyn ZrO2微粒在复杂生物样品的蛋白消化物中高特异,高重复性实现磷酸化肽的富集。MagReSyn ZrO2微粒可以单独使用也可与MagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC联合应用,富集不同类型的磷酸肽。
5.       MagReSyn Ti-IMAC
螯合了Ti4+金属离子的磁性微粒,用于高特异性磷酸肽富集
高通量磷酸化蛋白质组学分析要求与质谱兼容的磷酸化肽特异性富集手段。MagReSyn Ti-IMAC微粒具有能与Ti4+螯合的磷酸基团活化的弹性链接(减少了空间位阻)。这种性MagReSyn微粒能在复杂生物样品的蛋白消化物中高特异,高重复性的实现磷酸化肽富集。MagReSyn Ti-IMAC微粒可以单独使用也可与MagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC联合应用,富集不同类型的磷酸肽。
6.       MagReSyn HILIC
多模式(multi-mode) HILIC微粒,用于质谱前样品的清洁(cleanup)
样品准备的多种环节可能引入污染,导致质谱结果多变。消化和MS分析前样品准备(清洁)的方法/工具包括色谱柱,脱盐柱(膜)和区段用packed tips等鱼贯式流程。虽然这些技术广泛应用,但是他们不能自动化,或不能优化用于平行处理而实现高通量。为了清洁过程的全面自动化,ReSyn Biosciences开发了移除污染用的普适性磁性混合模式HILIC。其自动化清洁流程减少了样品处理步骤,实现大规模平行样品制备,赢得了大量客户。
MagReSyn HILIC用于平行蛋白样的MS分析前净化清洁,重现性高,流程全面自动化。这一产品可用于干扰MS分析的各种普通污染的清洁。
7.       MagReSyn Amine
伯胺功能性支持微粒,用于配体吸附或化学修饰
NH2功能性微粒可通过离子相互作用物理吸附生物分子,或通过化学功能化,利用多种双功能化学偶联试剂共价结合生物分子。常用于偶联的试剂包括戊二醛(glutaraldehyde)和1,4-丁二醇二缩水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether)。
8.       MagReSyn羧基(MagReSyn Carboxyl)
通过伯胺残基共价结合,用于配体的固化
MagReSyn羧基磁性聚合微粒通过碳二亚胺-琥珀酰亚胺酯(carbodiimide-succinimidyl ester)活化和后续酰胺键形成来共价固化含伯胺的配体。羧基活化有多种策略,但偶联蛋白和其它含伯胺的配体常用的方法是在水相中通过EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide)活化。这一反应可以通过一步反应或通过两步反应(添加N-hydroxysuccinimide (NHS)或更稳定的sulfo-NHS生成中间产物NHS酯或sulfo NHS ester)完成。
9.       MagReSyn链亲合素(MagReSyn Streptavidin)
强大的捕获生物素化分子的能力
MagReSyn链亲和素微粒含共价结合的链亲合素。聚合物的多孔特性具有*的链亲和素承载能力,使其具有*的固化/结合生物素化生物分子能力。*的链亲和素承载力使其只需使用10 µl的微粒,提高了实验微型化能力,更利于高通量自动化分析。MagReSyn链亲和素微粒可用于蛋白的固化和纯化、SELEX和焦磷酸测序用核酸捕获和单链DNA模板制备。经固化的生物素化抗体可用于后续的免疫检测中。
MagReSyn链亲合素MAX (MagReSyn Streptavidin MAX)
捕获生物素化分子用具*承载力的链亲和素磁珠
MagReSyn Streptavidin MAX根据客户需求订制,实现生物素分子结合能力的大化。满足高通量自动化分析微板应用的需求。
10.   MagReSyn Protein A
抗体和免疫沉淀等亲和纯化用高承载力蛋白A
MagReSyn Protein A微粒共价偶联的蛋白A能在血清样品中高特异性、单步纯化>95%的IgG。蛋白A为~56 kDa的棒状金黄色葡萄球菌(bacterium Staphylococcus aureus)细胞壁表面蛋白,广泛用于IgG抗体的高特异性纯化和免疫沉淀中。蛋白A含5个免疫球蛋白结合结构域折叠形成的三螺旋束(three-helix bundle),特异结合IgG抗体的Fc区域。蛋白A特异地、高亲和力结合人,兔,小鼠,豚鼠,猫和猪IgG。MagReSyn的高蛋白A承载能力使其能在实验中结合更多免疫球蛋白,实现实验的微型化(experimental miniaturization)。
MagReSyn Protein A MAX
*蛋白纯化和免疫沉淀能力的蛋白A
MagReSyn Protein A MAX根据客户需求订制,实现结合能力的大化。实现实验微型化,满足高通量自动化分析微板应用的需求。
11.   MagReSyn Protein G
抗体和免疫沉淀等亲和纯化用高承载力的蛋白A
MagReSyn Protein G微粒用于从生物样品中高特异捕获多种免疫球蛋白。重组的链球菌蛋白G(缺少白蛋白结合区,增加了免疫球蛋白特异性)共价连接在磁性微球上,减少了漏出,让蛋白G更稳定,适合更广阔的亲和纯化条件。蛋白G结合多种哺乳动物免疫球蛋白,具有比蛋白A更强的结合能力,包括人IgG3和大鼠IgG2a。不与人IgM, IgD或IgA结合。MagReSyn高的蛋白G承载能力使其能满足实验微型化需求,实现对血清样品中高特异性、单步纯化>95%的IgG。
12.   MagReSyn Trypsin
蛋白样品的质谱分析前制备,实现快速、自动化胰酶消化。
MagReSyn胰酶微粒共价固化了测序级胰酶(TPCK处理阻止胰凝乳蛋白酶活性),用于质谱分析前的蛋白消化。多孔的MagReSyn承载能力强,使其具有高的酶活性,快速实现胰酶消化。这种固化胰酶的性质稳定,能在变性条件下(包括尿素和SDS条件)保持活性,自溶性有限,实现了消化流程的自动化和微型化,提高了消化的重现性。
13.   MagReSyn Chymotrypsin
快速,自动化实现质谱前蛋白样品的胰凝乳蛋白酶消化
MagReSyn Chymotrypsin微粒由共价固化的测序级胰凝乳蛋白酶(TLCK处理阻止胰酶活性)用于质谱分析前的蛋白消化。多孔MagReSyn具有的高承载能力,消化能力高,实现了快速消化。磁珠固化的胰凝乳蛋白酶能自动化,微型化消化流程,提高实验重现性。胰凝乳蛋白酶对疏水残基切割能力强,与MagReSyn Trypsin蛋白消化覆盖力互补。

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