ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。
在进行ELISA试剂盒试验时,有人会问发现,ELISA试剂盒吸光度值衰减,为了能更好地处理这一问题,我们得现了解什么是Elisa试剂盒吸光度值衰减,就是指加完显色液(购买)显色一定时间后,再加终止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即测试其吸光度值,等过几分钟再测试吸光度值,发现两次测得的吸光度值发生衰减.二次均小于一次.并且,加终止液时,从一条加到12条后,测试发现,吸光度值从1-12条逐级衰减.前提是这12条酶标板都是同一种产品,并且包被相同蛋白.出现衰减我们该怎么办呢,我们下面来仔细说说。
① 显色时间调整,如果你现在的显色时间是10MIN,那调整到30MIN,再加终止液,观察上述现象是否出现.
② 终止液中加入少量甘油看下怎么样.建议您使用BIM品牌的ELISA试剂盒,显色时间是30分钟,终止后要求在30分钟内检测,加入终止液后,建议在加入终止液后2到3分终内检测,这是OD值相对比较高.拟合值能达到四个9.
以上就是ELISA试剂盒吸光度值衰减的处理方法,希望能帮助大家更好地使用ELISA试剂盒。