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处理保存ELISA试剂盒时需要注意哪些要点?

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  在ELISA试剂盒中通常有3次加样步聚,即加标本,加酶联络物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留心不可溅起,不可发生气泡。加标本通常用微量加样器,按规矩的量参加板孔中。每次加标本应更换吸嘴,防止发作交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。
 
  在处理和保存方面ELISA试剂盒要考虑以下几个方面:
 
  1.要注意防止呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有相似过氧化物的活性,因此,在以HRP为符号酶的ELISA试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很简单在温育过程中吸附于固相,从而与后边加入的HRP底物反响显色。
 
  2.样本的采集及血清别离中要注意尽量防止细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白发生分化效果;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定办法发生非特异性干扰。
 
  3.血清标本如是以无菌操作别离,则能够在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长期保存,应在-70℃以下。
 
  4.冰冻保存的血清标本须注意防止因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生破坏效果,ELISA试剂盒从而引起假阴性成果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振动,重复倒置混匀即可。
 
  5.标本在保存中如呈现细菌污染所造成的的混浊或絮状物时,应离心沉积后取上清检测。
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