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ELISA试剂盒的代测主要有哪几种方法?

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  ELISA试剂盒运用的基本原理就是将抗原抗体固定到特定的载体上进行反应,并通过酶催化底物发生化学变化,将抗原抗体反应通过颜色的办法显现出来。固相吸附蛋白对错特异性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才华,为了确保抗原抗体反应的特异性,因而被剩余的固相表面应该用抗原抗体反应无关蛋白封闭,也可用脱脂奶粉、明胶、牛血清代替。酶可以通过共价键与抗原或抗体衔接构成结合物,当抗原抗体反应的时分,被检测靶方针中也结合了酶分子。
 
  ELISA试剂盒的代测方法:
 
  一、间接法:此测定办法与直接法相似,不一样在于级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一抗体来测定抗原量。
 
  优势:二抗能够加强信号,并且有多种挑选能做不一样的测定剖析,不加酶符号的一抗体则能保存它zui多的免疫反响性。
 
  缺陷:交互反响发作的机率较高。
 
  二、直接法:将抗原直接固定在固相载体上,参加酶符号的一抗体,即可测定抗原总量,此一抗体的特异性非常重要。
 
  优势:操作手续简略,因无须运用二抗可防止交互反响。
 
  缺陷:实验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对进步。
 
  三、双抗体夹心法
 
  优势:高活路,高专一性,抗原无须事前纯化。
 
  缺陷:抗原必定得具有两个以上的抗体部位。
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