体视显微镜荧光适配器的激发/发射滤光片配置技巧-北京群晓科苑生物技术有限公司

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体视显微镜荧光适配器的激发/发射滤光片配置技巧

更新时间：2025-11-26

　　体视显微镜(Stereo Microscope)常用于解剖、筛选和活体观察，通过加装体视显微镜荧光适配器，可实现对GFP、RFP等荧光标记样本的快速成像。然而，荧光信号弱、背景噪声高、串色等问题常源于滤光片配置不当。合理选择与搭配激发(Excitation)、发射(Emission)滤光片及二向色镜(Dichroic Mirror)，是获得高质量荧光图像的关键。

　　一、理解滤光片系统组成

　　典型的荧光适配器包含三部分：

　　激发滤光片：只允许特定波长的激发光通过(如470/40 nm用于GFP)；

　　二向色镜：反射激发光至样品，透射发射光至目镜/相机；

　　发射滤光片：阻挡残余激发光，仅透过样品发出的荧光(如525/50 nm)。

　　二、配置技巧与注意事项

　　避免串色：多色荧光观察时，确保各通道激发/发射光谱无重叠。例如，GFP与RFP组合较安全，而YFP与RFP易串色，需选用窄带滤光片。

　　优先选择带通(Bandpass)滤光片：相比长通(Longpass)，带通能更有效抑制背景噪声，提升信噪比。

　　匹配光源波长：LED荧光光源需覆盖所选激发波段。若使用汞灯，注意其强度在紫外区较强，适合DAPI。

　　验证实际效果：安装后先用阳性对照样本测试，调整曝光时间和增益，避免过曝或信号不足。

　　注意适配器兼容性：不同品牌体视镜(如Leica MZ10、Nikon SMZ25)接口尺寸不同，需确认滤光片模块是否匹配。

　　进阶建议：对于弱荧光样本，可搭配高灵敏度sCMOS相机，并关闭室内照明以减少杂散光干扰。

　　正确配置滤光片系统，能让普通体视显微镜焕发“荧光之眼”，在发育生物学、转基因筛选、神经科学等领域发挥强大作用。