详解维多珠ELISA试剂盒的操作流程、样本要求与结果判读标准-北京群晓科苑生物技术有限公司

关键词搜索： 3D细胞培养相关产品，多肽毒素，原代细胞，细胞因子，抗体，试剂盒，各类细菌、病毒荧光定量PCR试剂盒，转基因检测仪器和耗材等。

详解维多珠ELISA试剂盒的操作流程、样本要求与结果判读标准

更新时间：2026-02-09

　　维多珠ELISA试剂盒采用双抗体夹心法原理，专门用于检测血清中维多珠单抗浓度，是炎症性肠病治疗药物监测的重要工具。该技术具有高特异性、高灵敏度等特点，广泛应用于临床实验室。

　　样本要求与预处理规范

　　维多珠ELISA检测主要适用于血清样本。全血采集后需室温静置30分钟，4℃离心2000×g 10分钟，取上清即为血清。样本应避免溶血，反复冻融不超过3次。短期保存可置于4℃冷藏(≤24小时)，长期保存需-80℃分装冻存，运输时使用干冰或冷链箱(2-8℃)，避免剧烈震荡。对于高脂血或溶血样本，需进行超速离心或过滤处理，以消除基质效应干扰。样本稀释需使用试剂盒指定的稀释液(通常为PBS+1%BSA)，按说明书要求进行梯度稀释，确保检测浓度落在标准曲线范围内。

　　标准曲线绘制与质量控制

　　实验前需绘制标准曲线。用稀释液将标准品溶解至1000pg/mL，然后进行倍比稀释，通常设置6-8个浓度点(如1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、0 pg/mL)。将不同浓度标准品加入酶标板孔中，每个浓度设2-3个复孔。同时设置空白对照孔(只加稀释液)、阴性对照孔和阳性对照孔。标准品不得重复使用，未用完部分需-20℃分装保存，避免反复冻融。每板实验必须包含质控样本，确保标准曲线R²≥0.99，板内变异系数(CV)控制在合理范围内，保证实验结果的准确性和可重复性。

　　操作流程详解

　　实验开始前，将所有试剂从冰箱取出，室温平衡20分钟，确保温度一致。按照说明书配制洗涤液、酶标抗体、底物等工作液。向酶标板孔中加入包被抗体或抗原，4℃过夜或37℃孵育1-2小时，使固相包被。弃去液体后，每孔加入200-300μL洗涤液，静置1-2分钟后弃去，重复洗涤3-5次，拍干残留液体。加入封闭液，37℃孵育1-2小时，封闭未结合位点，再次洗涤3-5次。加入稀释后的样本和标准品，37℃孵育1-2小时，使抗原抗体特异性结合。洗涤后加入酶标抗体，37℃孵育1-2小时，再次洗涤5-6次。加入底物溶液，37℃避光孵育15-30分钟显色，当标准曲线出现明显蓝色梯度时，加入终止液终止反应，溶液由蓝色变为黄色。立即用酶标仪在450nm或492nm波长下读取各孔吸光度值(OD值)。

　　结果判读标准与临床意义

　　根据标准品的浓度和对应OD值绘制标准曲线，采用四参数或双对数曲线拟合，计算样本中维多珠单抗浓度。结果判读需结合临床背景：治疗药物监测(TDM)的目标浓度范围通常为5-10μg/mL，低于此范围可能提示药物暴露不足，需调整剂量；高于此范围可能增加不良反应风险，需减量或调整给药间隔。同时需考虑抗药抗体(ADA)的干扰，ADA阳性可能导致假阴性或假阳性结果，必要时需检测ADA水平进行综合判断。实验结果的报告应包括样本类型、检测项目、检测结果、参考范围、试剂盒名称和批号等信息，确保结果的可追溯性和临床应用的可靠性。

　　维多珠ELISA试剂盒的操作流程标准化、样本处理规范化和结果判读标准化，为炎症性肠病患者的个体化治疗提供了重要的实验室依据，是实现精准医疗的重要工具。